Descripción general
El acetato de icatibant es un tratamiento específico para la enfermedad del angioma hemangioide (AEH) desarrollado por Shire, que recibió la aprobación de la FDA el 25 de agosto de 2011, para el tratamiento de episodios agudos de angioedema hereditario en adultos de 18 años o más. También es el tercer fármaco aprobado por la FDA para tratar los ataques de AEH. El acetato de icatibant posee una estructura similar a un d-decapéptido similar a la bradicinina, pero contiene cinco aminoácidos no derivados de proteínas. Actúa como un potente antagonista competitivo selectivo de los receptores de bradiquinina tipo 2 (B2), aliviando la hinchazón local, la inflamación y el dolor asociados con los episodios de AEH al inhibir los efectos de la bradicinina. El AEH representa sólo una de varias indicaciones potenciales para las que puede estar indicado icatibant; Otras aplicaciones potenciales incluyen asma, cirrosis hepática y otros tipos de angioedema. En consecuencia, el acetato de icatibant exhibe un valor terapéutico significativo y amplias perspectivas de mercado.
Fórmula de estructura química deacetato de icatibante
EesencialIinformación
Nombre chino:醋酸艾替班特
Nombre en inglés: acetato de icatibanto
ID de empresa：GT-F005
CAS：138614-30-9；130308-48-4
Snúmero de serie：H-D-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thi-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH
Mfórmula molecular：C59H89N19O13S
Mpeso molecular：1304.52
acetato de icatibante espectro de EM
Ruta Sintética
1: Preparación de resina Fmoc-Arg(Pbf)-CTC
Se añaden 11,1 g de resina de clorotrifenilmetilcloruro con una tasa de sustitución de 0,9 mmol/g a la columna de reacción en fase sólida, seguido de la adición de resina hinchada con DMF durante 30 minutos. Suma 3.50μL de DIPEA a 12,98 g de Fmoc-Arg(Pbf)-OH y activar durante 5 minutos; luego agregue la resina hinchada con DMF y permita que la mezcla alcance el equilibrio después de 10 minutos. Añade otros 3,50μL de DIPEA, reaccionar a temperatura ambiente por 45 minutos, y finalmente sellar con metanol por 20 minutos. Evaporar la mezcla de reacción, lavar tres veces con DMF, tres veces con DCM y luego contraer tres veces con metanol durante 3 minutos, 5 minutos y 8 minutos respectivamente, produciendo resina Fmoc-Arg(Pbf)-CTC con una tasa de sustitución medida de 0,5 mmol/g.
2：Enganche de fmoc-oico-OH
Pesar 10 mmol de resina Fmoc-Arg (Pbf)-CTC y agregarlo a un reactor de fase sólida, hincharlo en DMF durante 0,5 h, luego retirar la protección Fmoc dos veces usando una solución DBLK al 20% durante 10 min y 5 min respectivamente; después del lavado, conjugarlo con Fmoc-Oic-OH. Disolver 11,73 g de Fmoc-Oic-OH, 4,9 g de HOBt y 6,1 ml de DIC en DCM (se puede agregar una pequeña cantidad de DMF para la solubilización), activar la mezcla en un baño de agua con hielo durante 7 minutos, luego transferirla al reactor de fase sólida y reaccionar a temperatura ambiente durante 1–2h. El punto final de la reacción se determina mediante el método de la indantrona. Al finalizar, aspire la mezcla de reacción, lave con DMF, retire la protección de Fmoc dos veces usando una solución DBLK al 20% durante 10 min y 5 min respectivamente, lave nuevamente y prepárese para el acoplamiento con el siguiente aminoácido.
3：Enganche de fmoc-D-ciudad-OH
Disolver 11,91 g de Fmoc-D-Cit-OH, 5,00 g de HOAt y 11,4 g de HATU en DCM (con una pequeña cantidad de DMF añadida para la solubilización). Agregue 3,87 g de DIPEA en un baño de agua con hielo y active durante 7 minutos; luego transferir la mezcla a un reactor de fase sólida y reaccionar a temperatura ambiente durante 1–2 horas. La finalización de la reacción se determina mediante el método indiol. Después de la reacción, retire la mezcla de reacción, lave con DMF y elimine la protección de Fmoc usando una solución DBLK al 20%. Después del lavado, prepárese para el acoplamiento con el siguiente aminoácido.
4：Enganche de fmoc-Ser(tBu)-OH
Disolver 11,49 g de Fmoc-Ser(tBu)-OH, 5,00 g de HOAt y 6,1 ml de DIC en DCM (con una pequeña cantidad de DMF añadida para la solubilización). Después de la activación bajo un baño de agua con hielo durante 7 minutos, transferir la mezcla a un reactor de fase sólida y reaccionar a temperatura ambiente durante 1–2 horas; La finalización de la reacción se determina mediante el método del indiol. Al finalizar, retire la mezcla de reacción, lave con DMF, luego elimine la protección de Fmoc usando una solución DBLK al 20%, seguido de lavado antes de proceder al acoplamiento con el siguiente aminoácido.
5：Enganche de fmoc-esto-OH
Disolver 11,79 g de Fmoc-Thi-OH, 5,00 g de HOBt y 11,37 g de HBTU en DCM (con una pequeña cantidad de DMF añadida para la solubilización). Agregue 3,87 g de DIPEA en un baño de agua con hielo y active durante 7 minutos; luego transferir la mezcla a un reactor de fase sólida y dejar reaccionar a temperatura ambiente durante 1–2 horas. La finalización de la reacción se determina mediante el método indiol. Después de la reacción, retire la mezcla de reacción, lave con DMF y elimine la protección de Fmoc usando una solución DBLK al 20%. Después del lavado, prepárese para el acoplamiento con el siguiente aminoácido.
6：Enganche de fmoc-Gly-OH
Disolver 8,91 g de Fmoc-Gly-OH, 5,00 g de HOBt y 9,63 g de TBTU en DCM (con una pequeña cantidad de DMF añadida para la solubilización). Añadir 3,63 g de TMP en un baño de agua con hielo y activar durante 7 minutos; luego transferir la mezcla a un reactor de fase sólida y dejar reaccionar a temperatura ambiente durante 1–2 horas. La finalización de la reacción se determina mediante el método de la indanona. Después de la reacción, retire la mezcla de reacción, lave con DMF y elimine la protección de Fmoc usando una solución DBLK al 20%. Después del lavado, prepárese para el acoplamiento con el siguiente aminoácido.
7：Enganche de fmoc-Hipo(tBu)-OH
Disolver 12,27 g de Fmoc-Hipo(tBu)–OH, 5,00 g de HOAt y 9,66 g de TATU en DCM (con una pequeña cantidad de DMF añadida para la solubilización). Añadir 3,63 g de TMP en un baño de agua con hielo y activar durante 7 minutos; luego transferir la mezcla a un reactor de fase sólida y reaccionar a temperatura ambiente durante 1–2 horas. El punto final de la reacción se determina mediante el método del indiol. Una vez finalizada, retire la mezcla de reacción, lave con DMF y elimine la protección de Fmoc utilizando una solución DBLK al 20%. Después del lavado, prepárese para el acoplamiento con el siguiente aminoácido.
8：Enganche de fmoc-Pro-OH
Disolver 10,11 g de Fmoc-Pro-OH, 5,00 g de HOAt y 11,4 g de HATU en DCM (con una pequeña cantidad de DMF añadida para la solubilización). Agregue 3,87 g de DIPEA en un baño de agua con hielo y active durante 7 minutos; luego transferir la mezcla a un reactor de fase sólida y reaccionar a temperatura ambiente durante 1–2 horas. El punto final de la reacción se determina mediante el método del indiol. Al finalizar, retire la mezcla de reacción, lave con DMF y elimine la protección de Fmoc usando DBLK al 20%. Después del lavado, prepárese para acoplarse con el siguiente aminoácido.
9：Enganche de fmoc-Arg(Pbf)-OH
Disolver 19,44 g de Fmoc-Arg(Pbf)-OH, 5,00 g de HOAt y 11,4 g de HATU en DCM (con una pequeña cantidad de DMF añadida para la solubilización). Agregue 3,87 g de DIPEA en un baño de agua con hielo y active durante 7 minutos; luego transferir la mezcla a un reactor de fase sólida y reaccionar a temperatura ambiente durante 1–2 horas. La finalización de la reacción se determina mediante el método indiol. Después de la reacción, retire la mezcla de reacción, lave con DMF y elimine la protección de Fmoc usando una solución DBLK al 20%. Después del lavado, prepárese para el acoplamiento con el siguiente aminoácido.
10：Enganche de fmoc-D-Arg(Pbf)-OH
Disolver 19,44 g de Fmoc-D-Arg(Pbf)-OH, 5,00 g de HOAt y 11,4 g de HATU en DCM (con una pequeña cantidad de DMF añadida para la solubilización). Agregue 3,87 g de DIPEA en un baño de agua con hielo y active durante 7 minutos; luego transferir la mezcla a un reactor de fase sólida y reaccionar a temperatura ambiente durante 1–2 horas. El punto final de la reacción se determina mediante el método de la indiolona. Una vez finalizada, retire la mezcla de reacción, lave con DMF y luego use DBLK al 20% para eliminar la protección de Fmoc. Lavar tres veces con DMF, tres veces con DCM y tres veces con metanol para la contracción (durante 3 min, 5 min y 8 min respectivamente), seguido de secado al vacío para obtener resina de acetato de péptido etibant.
Cromatograma HPLC de acetato de icatibant
11：Pirólisis de resina de acetato de icatibant.
Prepare 200 ml de reactivo de lisis que contenga 190 ml de ácido trifluoroacético, 6 ml de triisopropilsilano y 4 ml de agua y preenfríelo en el refrigerador durante 30 minutos. Agregue 20,0 g de resina de acetato de péptido etibant a un matraz de fondo redondo de 500 ml, luego agregue el reactivo de lisis de 200 ml preparado a la resina mientras se agita en un baño de hielo y bajo un flujo de nitrógeno. Después de 30 minutos de reacción, retirar el baño de hielo y continuar la reacción a temperatura ambiente durante 2 horas. Filtrar la resina y recoger el filtrado. Lavar la resina con una pequeña cantidad de ácido trifluoroacético, filtrar y combinar los filtrados. Añadir gradualmente el filtrado a 20 litros de éter enfriado con hielo; se forma un precipitado blanco. Centrifugar a 3000 rpm para recoger el precipitado, lavar cinco veces con éter enfriado con hielo y secar a presión reducida para obtener 10,3 g de péptido crudo con pureza por HPLC>90%.
