La 5-aminofluoresceína (también llamada 5-AF o fluoresceinamina) se usa ampliamente como reactivo de marcado fluorescente. La amina primaria de la 5-aminofluoresceína puede reaccionar con grupos carboxilo (mediante activación EDC/NHS), aldehídos, cetonas o ésteres activados (p. ej., ésteres NHS) para formar enlaces amida o imina estables. Muestra un máximo de excitación a ~490 nm (λmax = 496 nm en tampón de borato pH 8,5) y un máximo de emisión a ~515 nm, entregando una señal verde brillante con buena fotoestabilidad y un desplazamiento de Stokes de aproximadamente 40 nm. Su intensidad de fluorescencia depende del pH, aumentando notablemente en condiciones alcalinas (pH 8-9), lo que se atribuye a cambios en el estado de protonación del grupo amino.
La 5-aminofluoresceína ha encontrado un amplio uso en la investigación biológica y médica, desde el etiquetado de proteínas y anticuerpos hasta la construcción de sistemas de administración de fármacos específicos y sensores fluorescentes. La 5-aminofluoresceína también es un intermediario clave en la síntesis de isotiocianato de fluoresceína (isómero I de FITC), uno de los reactivos más populares para el etiquetado de proteínas.
|
Parámetro |
Especificación |
|
CAS |
3326-34-9 |
|
Fórmula molecular |
C₂₀H₁₃NO₅ |
|
Peso molecular |
347,32 g/mol |
|
Pureza (HPLC) |
≥95% – ≥98% (grado de referencia ≥99% disponible bajo pedido) |
|
Cualquier impureza |
≤0,5–1,0% (depende del grado) |
|
impureza total |
≤1,0–2,0% |
|
Apariencia |
Polvo cristalino de color marrón rojizo a marrón oscuro |
|
Punto de fusión |
223°C (desc.) (encendido) |
|
λmáx (absorción) |
496 nm (tampón de borato pH 8,5) |
|
Excitación/emisión |
Ex 490 nm, Em 515 nm (o 494-495/518-520 nm) |
|
Densidad |
1,6±0,1 g/cm³ (previsto) |
|
Punto de ebullición |
695,3±55,0 °C a 760 mmHg |
|
Punto de inflamabilidad |
374,3±31,5 °C |
|
pka |
9,34 ± 0,20 (previsto) |
|
Solubilidad |
Soluble en metanol (5 mg/ml), DMSO, DMF, acetona; parcialmente soluble en agua |
|
Forma fisica |
Polvo sólido |
|
Almacenamiento |
2-8°C, sellado, seco, protegido de la luz; para almacenamiento a largo plazo, mantener a -20°C en atmósfera de argón |
|
Estabilidad |
Estable durante al menos 2 años si se almacena a +4°C, en un lugar seco y oscuro. |
|
Sensibilidad |
Sensible a la luz y a la humedad |
|
WGK Alemania |
3 |
|
BRN |
48395 |
|
Símbolos de peligro |
xn |
|
Códigos de riesgo |
22-36/37/38 |
|
Declaraciones de seguridad |
26 |
|
Clasificación SGA |
Toxina aguda. 4 (orales); Irritación de los ojos. 2; Irritación de la piel. 2; STOT SE 3 |
El 5-AF normalmente se sintetiza a partir del ácido 4-nitroftálico, seguido de una reducción (p. ej., con hidrazina/FeOOH) y una condensación con resorcinol en ácido metanosulfónico. El producto bruto es una mezcla de 5 y 6 isómeros, que se separan por cristalización. Los métodos modernos (asistidos por microondas o enzimáticos) pueden mejorar el rendimiento y reducir los subproductos. La purificación final por HPLC garantiza una pureza ≥95%, con estructura confirmada por RMN y EM.
Almacenamiento: el compuesto es sensible a la luz, el aire y la humedad. Almacenar en un recipiente sellado y purgado con argón a 4°C en la oscuridad. Para almacenamiento a largo plazo (>6 meses), se recomienda -20°C en forma de polvo (estable durante al menos 3 años). Las soluciones en DMSO se pueden almacenar a -80°C durante 6 meses o a -20°C durante 1 mes. Evite ciclos repetidos de congelación y descongelación. El transporte a temperatura ambiente es aceptable si se protege de la luz y la humedad.
R: Ambos son tintes verdes fluorescentes, pero sus grupos reactivos difieren.
● 5‑AF tiene una amina primaria (–NH₂). Requiere la activación del grupo carboxilo de un objetivo (usando EDC/NHS) antes de la conjugación. Lo mejor para marcar moléculas que ya contienen un grupo carboxilo.
● FITC tiene un grupo isotiocianato (–N=C=S) que reacciona directamente con aminas en el objetivo (por ejemplo, residuos de lisina en proteínas); no se necesita activación previa. FITC es más conveniente para el etiquetado de proteínas de rutina.
● Elija 5‑AF si necesita una conjugación orientada específica (por ejemplo, mediante un mango de carboxilo) o si planea sintetizar derivados fluorescentes personalizados. FITC es generalmente más sencillo para el etiquetado directo de anticuerpos.
R: El método más común es el acoplamiento de amida: active los grupos carboxilo en la molécula objetivo con EDC y NHS (en tampón MES o PBS, pH 5,5–6,5), luego agregue 5‑AF y ajuste a pH 7,5–8,5. Incubar a temperatura ambiente o 37°C durante 2 a 4 horas. Para objetivos que contienen aldehídos (p. ej., glicoproteínas), utilice aminación reductora con cianoborohidruro de sodio. El colorante que no ha reaccionado se puede eliminar mediante desalación o diálisis. Una relación molar de tinte a proteína de 5:1 a 20:1 es un buen punto de partida.
|
Ventaja |
Detalle |
|
Fuerza de producción |
Campus con certificación GMP que abarca más de 100 mu, 3 talleres de usos múltiples, 6 líneas de producción de zona limpia de grado D y más de 150 reactores (20 L a 5000 L), que admiten hidrogenación, anaeróbica y de alta y baja temperatura; kg a tonelada de producción a escala. |
|
Entrega rápida |
Muestras de I+D: una semana; Pedidos comerciales: 1-2 meses después del pago. Transporte exprés (DHL/FedEx) o aéreo/marítimo disponible. |
|
Socios globales |
Con la confianza de más de 30 empresas farmacéuticas en EE. UU., Europa, India, Brasil y el sudeste asiático; Cooperación a largo plazo con fabricantes de medicamentos genéricos, CRO y distribuidores de estándares de impurezas. |
|
Exportador Licenciado |
Licencia válida de importación/exportación de medicamentos: sin demoras en el cumplimiento. |
|
Grados de calidad dual |
Tanto el grado de investigación/farmacéutico (≥98%) como el grado de impureza de alta pureza (≥99%) están disponibles para satisfacer las diversas necesidades de los clientes. |
Ya sea que necesite una pequeña muestra para un experimento piloto o grandes cantidades para la producción comercial, Cosperpharm está listo para ayudarlo. Contáctenos hoy para analizar sus requisitos de 5-aminofluoresceína y veamos cómo podemos ayudarlo a hacer avanzar su proyecto.
DIRECCIÓN
No. 2 Yangguang 3rd Road, Parque Industrial Duodao Chemical Cycle, Ciudad de Jingmen, Provincia de Hubei, China
Teléfono
Correo electrónico
![(S)-2-(4-fluoro-3,5-dimetilfenil)-4-metil-3-(2-oxo-2,3-dihidro-1H-imidazol-1-il)-2,4,6,7-tetrahidro-5H-pirazolo[4,3-c]piridin-5-carboxilato de terc-butilo](/upload/8820/tert-butyl-s-2-4-fluoro-3-5-dimethylphenyl-4-methyl-3-2-oxo-2-3-dihydro-1h-imidazol-1-yl-2-4-6-7-tetrahydro-5h-pyrazolo-4-3-c-pyridine-5-carboxylate-5455.webp "(S)-2-(4-fluoro-3,5-dimetilfenil)-4-metil-3-(2-oxo-2,3-dihidro-1H-imidazol-1-il)-2,4,6,7-tetrahidro-5H-pirazolo[4,3-c]piridin-5-carboxilato de terc-butilo")
![(S)-3-amino-2-(4-fluoro-3,5-dimetilfenil)-4-metil-2,4,6,7-tetrahidro-5H-pirazolo[4,3-c]piridin-5-carboxilato de terc-butilo](/upload/8820/tert-butyl-s-3-amino-2-4-fluoro-3-5-dimethylphenyl-4-methyl-2-4-6-7-tetrahydro-5h-pyrazolo-4-3-c-pyridine-5-carboxylate-307965.webp "(S)-3-amino-2-(4-fluoro-3,5-dimetilfenil)-4-metil-2,4,6,7-tetrahidro-5H-pirazolo[4,3-c]piridin-5-carboxilato de terc-butilo")
