DOTAP (sal de cloruro) (cloruro de (2,3‑dioleoiloxipropil)trimetilamonio, también conocido como cloruro de 1,2‑dioleoil‑3‑trimetilamonio‑propano) es un lípido catiónico sintético que presenta un grupo de cabeza de amonio cuaternario que lleva permanentemente una carga positiva, unido a través de un esqueleto de glicerol a dos cadenas de ácidos grasos oleoílo (C18:1) insaturados. La estructura molecular de DOTAP (sal de cloruro) posiciona el resto de trimetilamonio en la posición sn-3 de la cadena principal de glicerol, creando un grupo de cabeza catiónico permanente que no depende del pH para la generación de carga. Las dos cadenas de oleoilo proporcionan un anclaje hidrófobo dentro de las bicapas lipídicas al tiempo que introducen dobles enlaces cis (Δ9) que confieren fluidez y facilitan la transición de laminar a hexagonal invertida (HII) transición de fase tras la fusión de la membrana. Esta combinación única de un grupo catiónico cargado permanentemente y cadenas de acilo insaturadas fluidizadas permite que DOTAP (sal de cloruro) forme espontáneamente liposomas catiónicos que se complejan electrostáticamente con ácidos nucleicos cargados negativamente, produciendo lipoplexos que transfectan eficientemente una amplia gama de tipos de células eucariotas con una citotoxicidad mínima.
DOTAP (sal de cloruro) es un lípido catiónico ampliamente establecido para la transfección liposomal de ADN (plásmidos, bácmidos), ARN (ARNm, ARNip) y ácidos nucleicos modificados (oligonucleótidos antisentido) en células eucariotas, a menudo sin necesidad de lípidos auxiliares. Los liposomas catiónicos formados por DOTAP (sal de cloruro) encapsulan material genético cargado negativamente a través de interacciones electrostáticas, formando lipoplexos que se fusionan con las membranas celulares y entregan su carga útil directamente al citoplasma. DOTAP (sal de cloruro) demuestra una alta eficiencia de transfección en diversas líneas celulares, incluidas células CHO, HEK293T, HeLa, PC3 (cáncer de próstata) y A549 (cáncer de pulmón), y la viabilidad celular generalmente supera el 80 % cuando se siguen protocolos optimizados. Más allá de la transfección convencional, DOTAP (sal de cloruro) se ha formulado con éxito en nanopartículas lipídicas (LNP) y bicelas catiónicas para la administración de ARNip a través de la barrera hematoencefálica (BBB), lo que permite aplicaciones neuroterapéuticas en la enfermedad de Alzheimer y otros trastornos del SNC. El rendimiento predecible, la facilidad de formulación y la capacidad comprobada de DOTAP (sal de cloruro) para facilitar la administración intracelular lo han convertido en el lípido catiónico de primera elección en el campo de la administración de genes durante más de tres décadas. Además, DOTAP (sal de cloruro) se puede utilizar para la transfección de cromosomas artificiales de levadura (YAC) con o sin suero, ampliando aún más su utilidad en aplicaciones de ingeniería genética.
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Ventajas del producto
1. Lípido catiónico estándar de oro para la transfección de ácidos nucleicos
DOTAP (sal de cloruro) es el lípido catiónico más ampliamente establecido para la transfección de ADN, ARN y oligonucleótidos. El grupo de cabeza de amonio cuaternario cargado permanentemente forma complejos electrostáticos estables con ácidos nucleicos cargados negativamente, produciendo lipoplexos que ingresan eficientemente a las células.
2. Alta eficiencia de transfección con baja citotoxicidad
DOTAP (sal de cloruro) demuestra capacidades de transfección superiores en líneas celulares PC3 y A549 en comparación con los reactivos comerciales, con una viabilidad celular que generalmente supera el 80 %. Las dos cadenas de oleoilo insaturadas confieren fluidez a la membrana que facilita el escape endosómico y minimiza los efectos citotóxicos.
3. Apoya el escape endosómico: un paso clave en la entrega de ARN
Las cadenas de oleoilo insaturadas (C18:1, Δ9 cis) promueven la transición de fase lamelar a hexagonal invertida (HII) tras la acidificación dentro de los endosomas, lo que permite el mecanismo flip-flop que libera ácidos nucleicos en el citoplasma antes de la degradación lisosomal.
4. Permite la entrega de ARNip a través de la barrera hematoencefálica
Cuando se formula en bicelas catiónicas con DPPC y DHPC, DOTAP (sal de cloruro) se ha utilizado con éxito para administrar ARNip a través de la BHE en un modelo humano in vitro, abriendo nuevas vías terapéuticas para los trastornos del SNC.
5. Formulaciones versátiles: liposomas, LNP y bicelas catiónicas
DOTAP (sal de cloruro) es muy eficaz en liposomas, LNP y bicelas catiónicas. Su rendimiento predecible lo convierte en la mejor opción para vacunas de ARN, productos de terapia génica y neuroterapéuticos.
6. Amplia compatibilidad con ácidos nucleicos
Transfecta eficientemente ADN plasmídico, bácmidos, ARNm, ARNip, oligonucleótidos antisentido y YAC, tanto en medios sin suero como en medios que contienen suero.
Preguntas frecuentes
P1: ¿Cuáles son las aplicaciones principales de DOTAP (sal de cloruro)?
A: Transfección liposomal de ADN, ARN, oligonucleótidos y YAC en células eucariotas. También formulado en LNP y bicelas catiónicas para la entrega de ARN a través de la BHE y para terapia génica.
P2: ¿Es peligroso el DOTAP (sal de cloruro)?
R: Algunos proveedores lo clasifican como no peligroso; otros indican que es un irritante de moderado a grave para la piel y los ojos y muy tóxico para la vida acuática. Palabra de advertencia: Advertencia. Uso en campana extractora con EPI. Prevenir su liberación al medio ambiente.
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